რეკომბინანტული ცილის ანტიგენებს ხშირად აქვთ რამდენიმე განსხვავებული ეპიტოპი, რომელთაგან ზოგიერთი არის თანმიმდევრული ეპიტოპი, ზოგი კი სტრუქტურული ეპიტოპი.დენატურირებული ანტიგენებით ცხოველების იმუნიზაციით მიღებული პოლიკლონური ანტისხეულები არის ცალკეული ეპიტოპებისთვის სპეციფიკური ანტისხეულების ნარევები და შეიძლება გამოყენებულ იქნას ზოგადად ბუნებრივი სტრუქტურების ან დენატურირებული სამიზნე ცილების გამოსავლენად.დენატურირებული ცილების იმუნოგენებად გამოყენების გვერდითი უპირატესობა ის არის, რომ დენატურირებული ცილები უფრო იმუნოგენურია და შეუძლიათ ცხოველებში ძლიერი იმუნური პასუხის სტიმულირება.
Escherichia coli-ს ექსპრესიის სისტემა ჩვეულებრივ შეირჩევა ანტიგენური მიზნებისთვის, რადგან ეს არის ყველაზე ძვირადღირებული სისტემა დროისა და ფულის თვალსაზრისით.სამიზნე ცილის გამოხატვის შესაძლებლობისა და გაწმენდის მოხერხებულობის გასაუმჯობესებლად, ზოგჯერ სამიზნე ცილის მხოლოდ მცირე ფრაგმენტი, როგორიცაა კონკრეტული დომენი, არის გამოხატული.
ცილების სამგანზომილებიანი სტრუქტურა
პროტეინის სპეციფიკური დომენი
თუ ანტისხეულების მომზადების მიზანი მხოლოდ wb გამოვლენაა, ეკონომიური და სწრაფია სინთეზური მცირე პეპტიდის ანტიგენად გამოყენება, მაგრამ არსებობს სუსტი იმუნოგენურობის ან არარეგენულობის რისკი პეპტიდური სეგმენტის არასათანადო შერჩევის გამო.ვინაიდან ანტისხეულების მომზადება მოითხოვს ხანგრძლივ პერიოდს, ორი ან სამი განსხვავებული პეპტიდური სეგმენტი ხშირად ირჩევა ანტისხეულების მოსამზადებლად პოლიპეპტიდური ანტიგენის გამოყენებით, რათა უზრუნველყოს ექსპერიმენტის წარმატების მაჩვენებელი.
იმუნიზაციისთვის პოლიპეპტიდური ანტიგენის სისუფთავე საჭიროა 80%-ზე მეტი იყოს.მიუხედავად იმისა, რომ უფრო მაღალი სისუფთავით შეიძლება თეორიულად მიიღონ ანტისხეულები უკეთესი სპეციფიკით, პრაქტიკაში, ცხოველები ყოველთვის აწარმოებენ დიდი რაოდენობით არასპეციფიკურ ანტისხეულებს, რითაც ნიღბავს ანტიგენის სისუფთავის სარგებელს.
გარდა ამისა, მცირე პეპტიდებიდან ანტისხეულების მომზადება უნდა იყოს ჯვარედინი დაკავშირებული შესაბამის მატარებელ ანტიგენთან, რათა გაზარდოს მისი იმუნოგენურობა.ორი საერთო ანტიგენური მატარებელია KLH და BSA.
გამოქვეყნების დრო: მარ-23-2023