ხანგრძლივი პეპტიდების სინთეზის პრობლემები და გადაწყვეტილებები

ბიოლოგიურ კვლევაში ჩვეულებრივ გამოიყენება პოლიპეპტიდები გრძელი თანმიმდევრობით.პეპტიდებისთვის, რომელთა თანმიმდევრობით 60-ზე მეტი ამინომჟავაა, მათ მისაღებად ძირითადად გამოიყენება გენის გამოხატულება და SDS-PAGE.თუმცა, ამ მეთოდს დიდი დრო სჭირდება და საბოლოო პროდუქტის გამოყოფის ეფექტი არ არის კარგი.

გამოწვევები და გადაწყვეტილებები ხანგრძლივი პეპტიდების სინთეზისთვის

გრძელი პეპტიდების სინთეზის დროს ჩვენ ყოველთვის ვაწყდებით პრობლემას, ანუ კონდენსაციის რეაქციის სტერეული შეფერხება იზრდება სინთეზში თანმიმდევრობის მატებასთან ერთად და საჭიროა რეაქციის დროის კორექტირება, რათა რეაქცია დასრულდეს.თუმცა, რაც უფრო გრძელია რეაქციის დრო, მით მეტი გვერდითი მოვლენა წარმოიქმნება და წარმოიქმნება სამიზნე პეპტიდის ნაწილი.ასეთი ნარჩენები - დეფიციტური პეპტიდური ჯაჭვები არის ძირითადი მინარევები, რომლებიც წარმოიქმნება ხანგრძლივი პეპტიდების სინთეზში.ამიტომ, ხანგრძლივი პეპტიდის სინთეზში, მთავარი პრობლემა, რომელიც უნდა გადავლახოთ, არის მაღალი ხარისხის რეაქციის პირობებისა და რეაქციის მეთოდების შესწავლა, რათა ამინომჟავის კონდენსაციის რეაქცია უფრო ყოვლისმომცველი და სრული გავხადოთ.გარდა ამისა, შეამცირეთ რეაქციის დრო, რადგან რაც უფრო გრძელია რეაქციის დრო, მით უფრო უკონტროლოა გვერდითი რეაქციები, მით უფრო რთულია გვერდითი პროდუქტები.აქედან გამომდინარე, შეჯამებულია შემდეგი სამი პუნქტი:

მიკროტალღური სინთეზის გამოყენება შესაძლებელია: ზოგიერთი ამინომჟავისთვის, რომლებიც გვხვდება სინთეზის პროცესში, რომელთა ინტეგრირება ადვილი არ არის, მიკროტალღური სინთეზის გამოყენება შესაძლებელია.ამ მეთოდს აქვს შესანიშნავი შედეგები და მნიშვნელოვნად ამცირებს რეაქციის დროს და ამცირებს ორი ძირითადი ქვეპროდუქტის წარმოქმნას.

შეიძლება გამოყენებულ იქნას ფრაგმენტების სინთეზის მეთოდიროდესაც ზოგიერთი პეპტიდის სინთეზირება რთულია საერთო სინთეზის მეთოდებით და არ არის ადვილი გასაწმენდი, ჩვენ შეგვიძლია მივიღოთ რამდენიმე ამინომჟავის მთლიანი კონდენსაცია პეპტიდის გარკვეულ სეგმენტში პეპტიდურ ჯაჭვში მთლიანობაში.ამ მეთოდს ასევე შეუძლია მრავალი პრობლემის გადაჭრა სინთეზში.

აცილჰიდრაზიდის სინთეზის გამოყენება შესაძლებელიაპეპტიდების აცილჰიდრაზიდის სინთეზი არის N-ტერმინალური Cys პეპტიდის და C-ტერმინალური პოლიპეპტიდის ჰიდრაზიდის მყარი ფაზის სინთეზის მეთოდი, ქიმიური სელექციური რეაქცია ამიდური ობლიგაციების წარმოქმნას შორის პეპტიდური კავშირის მეთოდის მისაღწევად.პეპტიდურ ჯაჭვში Cys-ის პოზიციიდან გამომდინარე, ეს მეთოდი მთელ პეპტიდურ ჯაჭვს ყოფს მრავალ თანმიმდევრობად და შესაბამისად ასინთეზებს მათ.საბოლოოდ, სამიზნე პეპტიდი მიიღება თხევადი ფაზის კონდენსაციის რეაქციის გზით.ეს მეთოდი არა მხოლოდ მნიშვნელოვნად ამცირებს ხანგრძლივი პეპტიდის სინთეზის დროს, არამედ მნიშვნელოვნად ზრდის საბოლოო პროდუქტის სისუფთავეს.

ხანგრძლივი პეპტიდური გამწმენდი

გრძელი პეპტიდების თავისებურება აუცილებლად იწვევს ნედლი პეპტიდების კომპლექსურ კომპონენტებს.აქედან გამომდინარე, ასევე გამოწვევაა ხანგრძლივი პეპტიდების გაწმენდა HPLC-ით.პოლიპეპტიდური გამწმენდი პროცესის ამილოიდური სერია, შთანთქავს დიდ გამოცდილებას და წარმატებით გამოიყენება ხანგრძლივი პეპტიდის გაწმენდაში.ახალი აღჭურვილობის მიღებით, მრავალი გამწმენდი სისტემის შერევით, განმეორებითი გამოყოფით და სხვა გამოცდილების მეთოდებით, პეპტიდის ხანგრძლივი გაწმენდის წარმატების მაჩვენებელი მნიშვნელოვნად გაუმჯობესდა.